内毒素检查法,2020药典细菌内毒素检查法

菌内毒素凝胶限度法各反应项的意义菌内毒素 检查法是判断供试品中的菌内毒素是否符合要求。兔子法和内毒素 检查法的优劣在于检测数据的准确性高，菌内毒素检验包括凝胶法和光度法两种方法，后者包括浊度法和显色基质法，比较细菌内毒素检测试剂盒(末端显色矩阵法)(以下简称试剂盒)中血清样本的不同处理方法，方法:10名健康志愿者加菌内毒素。

A:热原是由微生物产生的内毒素，是由磷脂、脂多糖和蛋白质组成的复合物，其中脂多糖是活性中心。热原的性质:①耐热性；②水溶性；③不挥发；④过滤；⑤吸附；⑥能被化学试剂破坏；⑦超声波也能破坏热原。热原污染的途径:①溶剂带入；②从原材料带入；(3)通过容器、器具、管道和装置；(4)通过制备过程带入；⑤灭菌后带入；⑥由输液器带入。

bacteria内毒素检查法是判断供试品内毒素中的细菌是否符合要求。内毒素(内毒素)是革兰氏阴性菌细胞壁中的脂多糖，其毒性成分为脂质a，细菌死亡解体后释放出来。菌内毒素检验包括凝胶法和光度法两种方法，后者包括浊度法和显色基质法。测试样品时，可以使用任何一种方法进行测试。当测定结果有争议时，除非另有规定，以凝胶法结果为准。

一、细菌内毒素医药领域细菌的测定内毒素定量检查法医药领域的应用主要是在其药物制剂生产过程的中央控制阶段和最终产品中的污染菌内毒素监测，如放射性药物和注射用药物。中国药典(2000年版)载有69种药品供内毒素检测。

比较细菌中血清样本的不同处理方法内毒素检测试剂盒(末端显色矩阵法)(以下简称试剂盒)内毒素。方法:在10名健康志愿者内毒素的血清中加入细菌，然后用高氯酸法、新高氯酸法、碱性试剂法和高温稀释法进行处理，最后计算细菌内毒素的回收率并进行统计分析。结果:4种血清样品处理方法的细菌内毒素回收率均在一般鲎试验要求的范围内(50% ~ 200%)

除碱性试剂法回收率外，其他三种处理方法差异显著(P均

阳性对照溶液的配制一般为2λ 内毒素溶液(λ为鲎试剂的标记灵敏度)。例如，鲎变形细胞溶解物的灵敏度为0.5EU/ml。取效价为1EU/片的内毒素工作产物(CSE)1片，加入1.0ml细菌内毒素试验水(TRW)，在涡旋混合器中摇匀23分钟，得到1.0 EU/ml。一般供试品阳性对照溶液的制备为含2λ 内毒素的供试品溶液。

国家规定好像是凝胶法。动态比浊法和凝胶法检测同一样品结果差异的原因很多内毒素: 1。动态比浊法比凝胶法灵敏得多，例如一个样品中内毒素的限量为0.40EU，动态比浊法检测结果约为0.35EU/ml，而凝胶法，当使用0.5EU金枪鱼时，2.动态浊度法和凝胶法中使用的内毒素标准之间存在差异。因为判断实验结果的质控品不同，实验结果会有很大误差！

光度测试应在特定的仪器中进行，温度一般为37℃±1℃。为保证浊度和显色试验的有效性，应事先进行标准曲线的可靠性试验和试液的干扰试验。当测试环境发生任何可能影响测试结果的变化时，应重新测试测试的有效性。标准曲线的可靠性试验用standard 内毒素配制标准曲线，并至少配制成三种稀释度(稀释度不得大于10)，最低浓度不得低于标示的鲎试剂检出限。

同时需要两个阴性对照。当阴性对照在设定时间内无反应时，所有数据进行线性回归分析。根据线性回归分析，标准曲线相关系数(r)的绝对值应大于或等于0.980，检验方有效。否则，必须重新测试。干扰试验选择标准线的中点或中点附近的浓度内毒素。根据表4制备溶液a、b、c和d。加样量、样品与鲎试剂的比例、鲎试剂的保持时间参照所用仪器和试剂的相关说明书执行。

具有检测数据准确性高的优点。缺点是操作复杂不方便，科技人员通过实验得出了结论。细菌内毒素是革兰氏阴性菌细胞壁上的脂多糖和蛋白质的复合物，在细菌死亡或自溶时会释放出来，内毒素大量血液会引起发热反应“热原反应”。内毒素与许多传染病密切相关，疾病的恶化往往伴随着内毒素的升高，疾病的缓解往往伴随着内毒素的降低。